poliacrilamida La electroforesis en gel (PAGE) es una técnica comúnmente utilizada en bioquímica, biología molecular y biotecnología para separar y analizar biomoléculas, particularmente proteínas y ácidos nucleicos, en función de su tamaño y carga. La técnica implica el uso de una matriz de gel compuesta de poliacrilamida, una sustancia que forma una red porosa cuando se polimeriza.

Durante la preparación del gel, los monómeros de acrilamida se mezclan con un agente reticulante, normalmente bisacrilamida, y un iniciador de polimerización. Luego se vierte esta mezcla en una bandeja de moldeo de gel y se deja polimerizar, formando un gel sólido. La concentración de acrilamida determina el rango de tamaño de las moléculas que se pueden resolver, siendo las concentraciones más bajas adecuadas para moléculas más grandes y las concentraciones más altas para moléculas más pequeñas.

Una vez solidificado el gel, se coloca verticalmente en un aparato de electroforesis que consta de dos electrodos conectados a una fuente de alimentación. El gel se sumerge en una solución tampón que conduce electricidad. Las muestras que contienen las biomoléculas de interés, normalmente mezcladas con un tampón de carga, se cargan en pocillos hechos en el gel.

Cuando se aplica una corriente eléctrica, las biomoléculas migran a través de la matriz del gel. La migración se produce debido a la carga eléctrica que transportan las biomoléculas y su interacción con la matriz del gel. Las moléculas más pequeñas se mueven más rápidamente a través de los poros del gel, mientras que las moléculas más grandes se ven obstaculizadas y migran más lentamente.

Después del proceso de electroforesis, el gel se puede teñir con tintes específicos o tratar con anticuerpos para visualizar y detectar las biomoléculas separadas. La imagen de gel resultante o el patrón de bandas pueden proporcionar información sobre el tamaño, la forma y la abundancia relativa de las moléculas en la muestra. Los investigadores suelen utilizar PAGE para identificar proteínas, analizar complejos de proteínas, evaluar la pureza de las proteínas y determinar el tamaño de los fragmentos de ácidos nucleicos.